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L'analyse par réaction en chaîne par polymérase (PCR) est une technique de laboratoire. Le but des tests PCR est de trouver de petites quantités d'ADN dans un échantillon, en utilisant un processus appelé amplification. Pendant l'amplification par PCR, l'ADN d'intérêt est copié à plusieurs reprises jusqu'à ce qu'il y en ait assez pour l'analyse et la détection. Par exemple, la PCR peut être utilisée pour identifier de petites quantités d'ADN provenant des organismes responsables de la gonorrhée ou de la chlamydia présents dans un échantillon d'urine.Comment fonctionne la PCR?
La première étape de la PCR est de créer amorces. Ce sont de courtes séquences d'ADN qui correspondent aux extrémités de l'échantillon d'ADN que vous essayez de détecter. Ils sont l'astuce pour trouver, amplifier et détecter un morceau particulier d'ADN. Ce morceau d'ADN peut être utilisé pour identifier un pathogène. Il peut également être utilisé pour détecter des gènes de résistance aux antibiotiques.
Une fois que vous avez vos amorces, l'étape suivante de la PCR consiste à chauffer l'échantillon de sorte que l'ADN double brin se sépare en deux brins simples - c'est ce qu'on appelle dénaturation. Puis les amorcessont combinés avec l'échantillon d'ADN. Après cela, un ADN polymérase est utilisé pour démarrer la réplication de l'ADN à l'emplacement de l'amorce. Enfin, l'ADN est chauffé pour séparer les brins une fois de plus. Avec cela, tout le processus de PCR recommence.
La quantité de segment d'ADN d'intérêt présent dans l'échantillon augmente de façon exponentielle à chaque cycle de PCR. Dans le premier cycle, une copie devient deux. Ensuite, deux copies deviennent quatre, puis huit, etc. Cette croissance exponentielle signifie que, généralement, seulement 20 à 40 cycles sont nécessaires pour déterminer si l'ADN en question est présent. (Si l'ADN est présent, 20 à 40 cycles sont également suffisants pour fournir un échantillon suffisant pour l'analyse).
Toutes les étapes d'une réaction en chaîne par polymérase - dénaturation de l'ADN, application des amorces et allongement de l'ADN - se produisent à différentes températures. Cela signifie qu'une fois le mélange initial assemblé, les étapes peuvent être contrôlées par un processus appelé thermocyclage. Le thermocyclage signifie que la température est maintenue aux niveaux nécessaires pendant juste assez longtemps pour que chaque étape ait lieu. Ainsi, la PCR est un moyen efficace d'amplifier la quantité d'ADN cible. En fait, cela peut être accompli dans un seul tube à essai avec peu d'intervention humaine.
La réaction en chaîne par polymérase a représenté une révolution dans la technique biologique lorsqu'elle a été développée pour la première fois au début des années 1980. Le créateur de PCR, Kary Mullis, a remporté le prix Nobel de chimie pour son travail en 1993.
Pourquoi la PCR est-elle pertinente pour le dépistage des MST
Réaction en chaîne par polymérase et techniques connexes telles que réaction en chaîne par ligase, se révèlent d'une importance croissante pour les tests de MST, car ces techniques permettent d'identifier directement de petites quantités d'ADN ou d'ARN viral dans les échantillons. L'identification du code génétique d'un pathogène ne nécessite pas que l'agent pathogène soit vivant, contrairement à la culture bactérienne ou à la culture virale. Il n'est pas non plus nécessaire que l'infection se soit produite il y a suffisamment de temps pour que les personnes aient développé une réaction d'anticorps détectable (la façon dont les infections sont détectées par ELISA). Cela signifie que les techniques de PCR peuvent parfois détecter les maladies plus tôt que d'autres tests. Mieux encore, les MST peuvent être détectées sans avoir à se soucier autant de garder les échantillons vivants ou de les tester exactement au bon moment.
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